Приём заказов:
Круглосуточно
Москва
ул. Никольская, д. 10.
Ежедневно 8:00–20:00
Звонок бесплатный

Проточная цитометрия (флоуцитометрия)

Диплом777
Email: info@diplom777.ru
Phone: +7 (800) 707-84-52
Url:
Логотип сайта компании Диплом777
Никольская 10
Москва, RU 109012
Содержание

Все это достигается тем, что используется конический сопловой аппарат с геометрическими параметрами, позволяющими получать ламинарный поток жидкости, что представляет важное условие корректного измерения. За счет давления проточной жидкости регулируется диаметр потока клеток: чем меньше это давление, тем шире поток клеток, и наоборот. Разность давлений между потоком клеток (более низкое давление) и потоком «обжимающей» жидкости (более высокое давление) выталкивает клетки, частицы наружу друг за другом. Далее испускаемый или отраженный клеткой световой сигнал измеряется и анализируется.
2. Оптический блок. После окрашивания клеток флуоресцентными красителями или флуоресцентно мечеными антителами свет, который излучает лазер, вступает во взаимодействие с флуоресцентными красителями и вызывает вынужденное излучение когерентных волн света с одинаковой длиной волны, фазой и поляризацией. Диаметр лазерного луча в точке фокуса составляет около 20 мкм вдоль проточного канала и 60 мкм поперек него, что обеспечивает быстрое пересечение клеткой пучка (в этом случае в пучке одновременно присутствует только одна клетка) и достаточно равномерное освещение по всей ширине потока клеток.
Флуоресцентные сигналы, которые появляются как результат взаимодействия лазерного излучения с клетками, фиксируются детекторами, ориентированными по ходу лазерного луча, а также перпендикулярно к нему. Популярные лазеры, используемые для проточной цитометрии: аргоновый лазер, который излучает свет в синем диапазоне (488 нм), фиолетовый лазер (405 нм), красный диодный лазер (635 нм) [3].
3. Блок обработки электронного сигнала и вывод данных. В процессе прохождения клетки через оптическую систему проточного цитометра рассеивание света или флуоресценция, вызванные каким-либо флуорохромом, который располагается на поверхности или внутри клетки, выявляются разными фотодекторами или фотоэлектронными умножителями (ФЭУ), преобразующими информацию о показателях клетки в обработанную запись компьютером.
Каждой анализируемой клеткой создается событие для каждого измеряемого параметра (боковое светорассеяние, прямое светорассеяние, интенсивность флуоресценции в соответствующем детекторе). Разными типами клеток демонстрируются конкретные сигналы для различных параметров.
При прохождении клетки через луч света, свет, который рассеивается в прямом направлении (преимущественно под углом 20 С к прямому ходу лазерного луча), называют прямым светорассеянием и фиксируют детектором, называемым детектором прямого светорассеяния (FSC) [3]. В данном направлении интенсивность рассеянного света является пропорциональной размеру самой клетки. Лазерные лучи отражаются от поверхности ядер клеток, а также от различных внутриклеточных структур.
Свет, который рассеивается под углом 90 С − боковое светорассеяние, фиксируется детектором (SSC) [3]. Данный параметр показывает оптическую плотность цитоплазмы клеток, гранулярность клетки и характер клеточных включений. С помощью фиксации бокового светорассеяния можно делать вывод о сложности внутреннего строения клетки, связанной, к примеру, с присутствием гранул, шероховатой поверхностью мембраны или спецификой ядра, приводящими к повышению интенсивности бокового светорассеяния.
Из световых сигналов преобразуются электрические импульсы, фиксируются ФЭУ, затем проходят обработку с помощью логарифмических и линейных усилителей.

Diplom777
Diplom777
Поделиться курсовой работой:
Поделиться в telegram
Поделиться в whatsapp
Поделиться в skype
Поделиться в vk
Поделиться в odnoklassniki
Поделиться в facebook
Поделиться в twitter
Похожие статьи
Раздаточный материал для дипломной работы образец

Когда студент выходит на защиту перед экзаменационной комиссией, ему требуется подготовить все необходимые материалы, которые могут повысить шансы на получение высокого балла. Один из таких

Читать полностью ➜
Задание на дипломную работу образец заполнения

Дипломная — это своеобразная заключительная работа, которая демонстрирует все приобретенные студентом знания во время обучения в определенном вузе. В зависимости от специализации к исследовательским работам

Читать полностью ➜