Проблема микробиологической чистоты лекарственных препаратов и пути ее решения

Мази, линименты, кремы, суппозитории, легко смешиваемые с водой: 10,0 г образца помещают в стерильную колбу, содержащую 100 мл буферного раствора и стерильные стеклянные бусы диаметром 5 – 6 мм. Смесь нагревают на водяной бане до температуры не выше (42,5±2,5)°С и энергично встряхивают до получения гомогенной эмульсии, которую используютдляколичественногоикачественногоопределения микроорганизмов.
Мази, линименты, кремы, суппозитории, трудно смешиваемые с водой: 10,0 г образца смешивают со стерильным твином-80, количество которого не должно быть более 1/2 объема образца (в данном случае 5 г). Смесь нагревают на водяной бане или в термостате до температуры не выше (42,5±2,5)°С и осторожно перемешивают. Время нагрева не должно превышать 30 мин. Добавляют необходимое количество предварительно нагретого до соответствующей температуры стерильного фосфатного буферного раствора со стеклянными бусами. Смесь осторожно перемешивают для получения гомогенной эмульсии в разведении 1:10, которую используют для количественного и качественного определения микроорганизмов. Возможно использование других технических средств, методик гомогенизации с соблюдением правил асептики и режимов термостатирования.
Жидкие лекарственные формы:
10,0 г (мл) образца – для определения общего числа аэробных микроорганизмов, дрожжевых и плесневых грибов в 1 мл препарата, для теста на отсутствие E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, C.albicans;
10,0 или 25,0 г (мл) образца – для испытания на отсутствие бактерий рода Salmonella;
10,0 г (мл) образца – для количественного определения энтеробактерий, устойчивых к желчи.
Растворы, суспензии, сиропы, микстуры. Переносят 10,0 г образца в 100 мл (10,0 мл — в 90,0 мл) буферного раствора, перемешивают и проводят количественное и качественное определение микроорганизмов.
Растворы в маслах, эмульсии. Помещают 10,0 г (мл) образца в стерильную колбу, содержащую 100 (90) мл буферного раствора (нейтрализующую жидкость) с твином-80 в количестве не более 5 % и стеклянные бусы. Смесь нагревают на водяной бане до температуры (42,5±2,5)°С и энергично встряхивают до получения гомогенной эмульсии, которую используют для количественного и качественного определения микроорганизмов.
Аэрозоли
Аэрозоли на основе спиртов и твердых веществ. Переносят 3,0 г образца (после испарения пропеллента) в 30 мл буферного раствора, перемешивают и проводят количественное и качественное определение микроорганизмов. Не менее 1,0 г образца, применяемого респираторно, используют для испытания на отсутствие энтеробактерий, устойчивых к желчи.
Аэрозоли на основе масел. Переносят 3,0 г образца (после испарения пропеллента) в стерильную емкость с 30 мл буферного раствора с твином-80 в количестве не более 5 % и стерильные стеклянные бусы. Смесь нагревают на водяной бане до температуры (42,5±2,5) оС и энергично встряхивают до получения гомогенной эмульсии, которую используют для количественного и качественного определения микроорганизмов.
Не менее 1,0 г образца, применяемого респираторно, используют для испытания на отсутствие энтеробактерий, устойчивых к желчи.
Трансдермальные пластыри. При отборе трансдермальных пластырей используют образец, состоящий из 10 единиц. С каждого из 10 пластырей снимают защитную пленку, пользуясь стерильными инструментами. При необходимости пластырь разрезают стерильными ножницами на более мелкие фрагменты, которые переносят в колбу вместимостью 1000 мл, содержащую 500 мл стерильного буферного раствора и стеклянные бусы (условное разведение 1:50). Колбу нагревают на водяной бане до температуры (42,5±2,5)°С, энергично встряхивают в течение 30 мин.
Используют по 50 мл полученного смыва для количественного определения микроорганизмов методом мембранной фильтрации и испытания на отсутствие P. aeruginosa и S. aureus.
Если известно, что пластырь обладает антимикробным действием, в разбавитель добавляют подходящий инактиватор (твин-80 и/или лецитин).
В случае, если смыв с трансдермальных пластырей нельзя использовать для определения методом мембранной фильтрации, применяют метод прямого посева на питательные среды, используя разведение 1:50.
Лекарственные растительные препараты
К лекарственным растительным препаратам (ЛРП) относятся препараты, произведенные или изготовленные из одного вида лекарственного растительного сырья или нескольких видов такого сырья и реализуемые в расфасованном виде во вторичной (потребительской) упаковке (пачки, пакеты, брикеты и пр.).
От каждой контролируемой серии лекарственного растительного препарата отбирают объединенную пробу, из которой выделяют образец для определения микробиологической чистоты – минимум 3-5 невскрытых потребительских упаковок общей массой не менее 50 г.
Перед испытанием потребительские упаковки вскрывают с помощью стерильных инструментов, отбирают из них пробу в равных количествах, перемешивают и переносят в стерильную емкость.
Для количественного определения аэробных микроорганизмов и грибов образец массой 10,0 г (плоды, кора, корни и корневища, почки и др.) или 2,0 г (трава, листья, цветки и другие с большим коэффициентом водопоглощения) переносят в стерильную колбу. При массе образца 10,0 г в колбу помещают 100 мл стерильного 0,9 % раствора натрия хлорида. Колбу с исследуемым образцом встряхивают на качалке или аппарате для встряхивания в течение не менее 15 мин. Полученный смыв считают разведением 1:10. При массе образца 2,0 г в колбу добавляют 200 мл стерильного 0,9 % раствора натрия хлорида. Полученный смыв считают разведением 1:100.
Если образец плохо смачивается, в колбу прибавляют поверхностно- активное вещество – стерильный твин-80 в количестве 0,1 % от объема раствора.
Из полученных смывов ЛРП, соответствующих разведениям 1:10 или 1:100, готовят последовательные десятикратные разведения в том же разбавителе. Количественное определение аэробных микроорганизмов проводят чашечным агаровым методом, как указано в разделе 5.